凍存細胞需要程序降溫儀

凍存細胞需要程序降溫儀

 程序冷凍儀是一種溫變速率可調的程序控制冷凍系統，廣泛應用于輕工、農、醫、基礎生物研究等各個(gè)領(lǐng)域中，用于淋巴細胞、組織庫、骨髓細胞、腫瘤細胞，動(dòng)、植物細胞、心肌細胞等的凍存。如何用好程序降溫儀，讓珍貴的免疫細胞，干細胞安全降溫，保持活性？

低溫生物學(xué)，生物體內水的形態(tài)變化：

在0℃到零下60 ℃溫度范圍內，細胞內生命活動(dòng)較活躍，且六角形冰晶會(huì )嚴重損傷細胞膜、細胞器。

在零下80 ℃到零下100 ℃溫度范圍內，細胞內生命活動(dòng)顯著(zhù)降低，細胞內會(huì )形成方形的冰塊，對細胞膜、細胞器損傷減弱。

在零下130 ℃為水的玻璃化溫度，在此溫度以下，細胞內水結為不定形冰，幾乎不傷害組織細胞膜結構，且細胞內生命活動(dòng)幾乎*停止。

細胞降溫過(guò)程中，降溫速率過(guò)快/過(guò)慢都會(huì )對細胞造成損傷以致影響復蘇活性，降溫過(guò)快-細胞內水迅速結晶，對細胞造成冰晶傷害；降溫過(guò)慢-細胞壁內外產(chǎn)生滲透壓，造成細胞脫水。降溫的不同階段，采用不同的降溫速率，可有效減少細胞損傷，提高復蘇率。

活細胞降溫方法

1、“經(jīng)典"次序降溫: +4°C > -20°C十-80C >長(cháng)期

2、直接放入液氮

3、玻璃化降溫技術(shù)

以上三種方法，復蘇后成活率高，但是很難規?；?；適用于大體積組胞

4、程序降溫儀:適用于原代細胞，對溫度變化高度敏感的細胞降溫

使用程序降溫儀的原因

提高樣品活性和復蘇率；

過(guò)程控制，消除批次實(shí)驗中的變數；

樣品保存時(shí)間久>10年；

降溫曲線(xiàn)可記錄存檔。

目前市面上常用的程序降溫儀工作原理是，通過(guò)微處理器控制系統和電磁閥，控制噴入腔體中的液氮量來(lái)控制降溫速率。其優(yōu)點(diǎn)是：控溫，受外界環(huán)境影響小。尤其是處理大體積樣本時(shí)，快速?lài)娙氲拇罅恳旱讕ё邩颖局械臐摕?，從而快速降溫，保證更好的樣本復蘇活性。

程序降溫儀是通過(guò)控制噴入腔體中的液氮量來(lái)控制降溫速率。一般為先慢凍，后快凍。我們的程序降溫儀主要有六種程序內容，包括2ml凍存管、96孔板、麥管、65-100ml造血干細胞(一)、65-100ml造血干細胞(二)、皮膚組織。這些內容都是經(jīng)過(guò)很多相關(guān)方面的專(zhuān)家、教授一起通過(guò)實(shí)驗研究得出的。

程序降溫儀的優(yōu)勢：

最新聚氨酯發(fā)泡技術(shù)，保溫性能好；

側開(kāi)門(mén)設計，存取樣品更方便；

高精度PID控制算法，控溫更精確；

能夠提高樣品的活性和復蘇率；

通過(guò)上位機軟件，可以數據連接電腦顯示以及實(shí)時(shí)打??；

凍存過(guò)程實(shí)時(shí)記錄，井可追溯和打印

CX系列智能程序降溫儀是我公司開(kāi)發(fā)研制成功的智能型冷凍儀。該儀器采用微機控制技術(shù)，專(zhuān)用軟件，能較準確地控制液氮的施放量，從而保證被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍。該儀器具有操作簡(jiǎn)便、人機界面清楚。

我國臨床低溫醫學(xué)工作發(fā)展迅速，促進(jìn)了移植醫學(xué)的發(fā)展，特別是在骨髓、造血干細胞、皮膚、角膜、內分泌腺體、以及血管和瓣膜等的冷凍保存和移植應用取得了顯著(zhù)成績(jì)。成功的造血干細胞移植依賴(lài)于造血干細胞活力的保存。

生物樣品在降溫冷凍過(guò)程中，當由液態(tài)向固態(tài)變化的相變期內會(huì )釋放一定熱量，使其溫度回升，不控制降溫速率的冷凍過(guò)程將會(huì )導致組織細胞死亡。準確地測定生物樣品的相變點(diǎn)，用微機編制降溫程序，以便在樣品相變時(shí)加大液氮輸入量，克服相變樣品溫度的回升，使細胞安全而迅速地度過(guò)相變期，這是提高被凍樣品成活率的關(guān)鍵環(huán)節。